Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gel electrophoresis គឺជាបច្ចេកទេសជាមូលដ្ឋាននៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍នៅទូទាំងវិញ្ញាសាជីវសាស្រ្ត ដែលអនុញ្ញាតឱ្យបំបែកម៉ាក្រូម៉ូលេគុលដូចជា DNA, RNA និងប្រូតេអ៊ីន។ប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយ និងយន្តការបំបែកផ្សេងគ្នាអនុញ្ញាតឱ្យសំណុំរងនៃម៉ូលេគុលទាំងនេះត្រូវបានបំបែកកាន់តែមានប្រសិទ្ធភាពដោយការទាញយកលក្ខណៈរូបវន្តរបស់ពួកគេ។សម្រាប់ប្រូតេអ៊ីនជាពិសេស polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) គឺជាបច្ចេកទេសនៃជម្រើស។
PAGE គឺជាបច្ចេកទេសដែលបំបែក macromolecules ដូចជាប្រូតេអ៊ីនដោយផ្អែកលើការចល័ត electrophoretic របស់ពួកគេ ពោលគឺសមត្ថភាពនៃការវិភាគដើម្បីផ្លាស់ទីឆ្ពោះទៅរកអេឡិចត្រូតនៃបន្ទុកផ្ទុយ។នៅក្នុង PAGE នេះត្រូវបានកំណត់ដោយបន្ទុក ទំហំ (ទម្ងន់ម៉ូលេគុល) និងរូបរាងរបស់ម៉ូលេគុល។ការវិភាគផ្លាស់ទីតាមរន្ធញើសដែលបង្កើតឡើងនៅក្នុងជែល polyacrylamide ។មិនដូច DNA និង RNA ប្រូតេអ៊ីនមានភាពខុសប្លែកគ្នាក្នុងបន្ទុកយោងទៅតាមអាស៊ីតអាមីណូដែលបានបញ្ចូល ដែលអាចមានឥទ្ធិពលលើរបៀបដែលពួកវាដំណើរការ។ខ្សែអាមីណូអាស៊ីតក៏អាចបង្កើតជារចនាសម្ព័ន្ធបន្ទាប់បន្សំដែលប៉ះពាល់ដល់ទំហំជាក់ស្តែងរបស់វា ហើយជាលទ្ធផលរបៀបដែលពួកគេអាចផ្លាស់ទីតាមរន្ធញើស។ដូច្នេះ ពេលខ្លះវាអាចជាការចង់បានប្រូតេអ៊ីន denature មុនពេល electrophoresis ដើម្បីធ្វើ linearize ពួកវា ប្រសិនបើការប៉ាន់ប្រមាណត្រឹមត្រូវនៃទំហំត្រូវបានទាមទារ។
ទំព័រ SDS
Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis គឺជាបច្ចេកទេសដែលប្រើដើម្បីបំបែកម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីននៃម៉ាស់ពី 5 ទៅ 250 kDa ។ប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានបំបែកដោយផ្អែកទៅលើទម្ងន់ម៉ូលេគុលរបស់វា។សូដ្យូម dodecyl sulfate ដែលជា surfactant anionic ត្រូវបានបន្ថែមនៅក្នុងការរៀបចំជែលដែលបិទបាំងការចោទប្រកាន់ខាងក្នុងនៃគំរូប្រូតេអ៊ីនហើយផ្តល់ឱ្យពួកគេនូវបន្ទុកស្រដៀងគ្នាទៅនឹងសមាមាត្រម៉ាស់។នៅក្នុងពាក្យសាមញ្ញ, វា denatures ប្រូតេអ៊ីននិងផ្តល់ឱ្យពួកគេនូវបន្ទុកអវិជ្ជមាន។
ទំព័រដើម
Native PAGE គឺជាបច្ចេកទេសដែលប្រើជែលដែលមិនមានជាតិពណ៌សម្រាប់ការបំបែកប្រូតេអ៊ីន។មិនដូច SDS PAGE ទេ គ្មានភ្នាក់ងារបន្សាបជាតិពុលត្រូវបានបន្ថែមក្នុងការរៀបចំជែលទេ។ជាលទ្ធផលការបំបែកប្រូតេអ៊ីនកើតឡើងនៅលើមូលដ្ឋាននៃបន្ទុកនិងទំហំនៃប្រូតេអ៊ីន។នៅក្នុងបច្ចេកទេសនេះ ការអនុលោមភាព ការបត់ និងខ្សែសង្វាក់អាស៊ីតអាមីណូនៃប្រូតេអ៊ីនគឺជាកត្តាដែលការបំបែកគឺអាស្រ័យលើ។ប្រូតេអ៊ីនមិនត្រូវបានខូចខាតនៅក្នុងដំណើរការនេះទេហើយអាចត្រូវបានរកឃើញវិញបន្ទាប់ពីការបញ្ចប់នៃការបំបែក។
តើ polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ដំណើរការយ៉ាងដូចម្តេច?
គោលការណ៍ជាមូលដ្ឋាននៃ PAGE គឺដើម្បីបំបែកការវិភាគដោយឆ្លងកាត់រន្ធញើសនៃជែល polyacrylamide ដោយប្រើចរន្តអគ្គិសនី។ដើម្បីសម្រេចបាននូវចំណុចនេះ ល្បាយ acrylamide-bisacrylamide ត្រូវបានធ្វើវត្ថុធាតុ polymerized (polyacrylamide) ដោយការបន្ថែមនៃ ammonium persulfate (APS) ។ប្រតិកម្មដែលត្រូវបានជំរុញដោយ tetramethylethylenediamine (TEMED) បង្កើតបានជារចនាសម្ព័ន្ធដូចសំណាញ់ដែលមានរន្ធញើសដែលតាមរយៈការវិភាគអាចផ្លាស់ទី (រូបភាពទី 2) ។ភាគរយនៃ acrylamide សរុបដែលរួមបញ្ចូលក្នុងជែលកាន់តែខ្ពស់ ទំហំរន្ធញើសកាន់តែតូច ហេតុដូចនេះ ប្រូតេអ៊ីនដែលតូចជាងនឹងអាចឆ្លងកាត់បាន។សមាមាត្រនៃ acrylamide ទៅ bisacrylamide ក៏នឹងប៉ះពាល់ដល់ទំហំរន្ធញើសដែរ ប៉ុន្តែជារឿយៗវានៅតែរក្សាដដែល។ទំហំរន្ធញើសតូចក៏កាត់បន្ថយល្បឿនដែលប្រូតេអ៊ីនតូចៗអាចផ្លាស់ទីតាមរយៈជែល ធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវគុណភាពបង្ហាញ និងការពារពួកវាពីការរត់ចូលទៅក្នុងសតិបណ្ដោះអាសន្នយ៉ាងឆាប់រហ័សនៅពេលដែលចរន្តត្រូវបានអនុវត្ត។
ឧបករណ៍សម្រាប់ Polyacrylamide Gel Electrophoresis
ក្រឡា Electrophoresis ជែល (ធុង / អង្គជំនុំជម្រះ)
ធុងជែលសម្រាប់ polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) គឺខុសគ្នាពីធុងជែល agarose ។ធុងទឹកជែល agarose គឺផ្ដេក ខណៈពេលដែលធុង PAGE គឺបញ្ឈរ។ដោយកោសិកា electrophoresis បញ្ឈរ (ធុង / អង្គជំនុំជម្រះ) ជែលស្តើងមួយ (ជាធម្មតា 1.0mm ឬ 1.5mm) ត្រូវបានចាក់រវាងចានកញ្ចក់ពីរហើយបានម៉ោនដូច្នេះថាផ្នែកខាងក្រោមនៃជែលត្រូវបានលិចនៅក្នុងសតិបណ្ដោះអាសន្នក្នុងបន្ទប់មួយ ហើយផ្នែកខាងលើត្រូវលិចក្នុងទ្រនាប់។ នៅក្នុងបន្ទប់ផ្សេងទៀត។នៅពេលដែលចរន្តត្រូវបានអនុវត្ត បរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្នតូចមួយធ្វើចំណាកស្រុកតាមរយៈជែលពីអង្គជំនុំជម្រះខាងលើទៅបន្ទប់ខាងក្រោម។ជាមួយនឹងការគៀបដ៏រឹងមាំដើម្បីធានាថាការជួបប្រជុំគ្នានឹងស្ថិតនៅក្នុងទីតាំងបញ្ឈរ ឧបករណ៍ជួយសម្រួលដល់ការដំណើរការរបស់ជែលបានយ៉ាងលឿនជាមួយនឹងភាពត្រជាក់ដែលបណ្តាលឱ្យមានក្រុមផ្សេងគ្នា។
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) ផលិតកោសិកា electrophoresis polyacrylamide ជាច្រើនទំហំ (ធុង/បន្ទប់)។ម៉ូដែល DYCZ-20C និង DYCZ-20G គឺជាកោសិកា electrophoresis បញ្ឈរ (ធុង/បន្ទប់) សម្រាប់ការវិភាគលំដាប់ DNA ។កោសិកា electrophoresis បញ្ឈរមួយចំនួន (ធុង / អង្គជំនុំជម្រះ) គឺត្រូវគ្នាជាមួយប្រព័ន្ធ blotting ដូចជាម៉ូដែល DYCZ-24DN, DYCZ-25D និង DYCZ-25E គឺត្រូវគ្នាជាមួយប្រព័ន្ធ Western Blotting គំរូ DYCZ-40D, DYCZ-40G និង DYCZ-40F, ដែលត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការផ្ទេរម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនពីជែលទៅភ្នាស។បន្ទាប់ពី SDS-PAGE electrophoresis, Western Blotting គឺជាបច្ចេកទេសមួយដើម្បីរកមើលប្រូតេអ៊ីនជាក់លាក់មួយនៅក្នុងល្បាយប្រូតេអ៊ីន។អ្នកអាចជ្រើសរើសប្រព័ន្ធ blotting ទាំងនេះតាមតម្រូវការពិសោធន៍។
Electrophoresis ការផ្គត់ផ្គង់ថាមពល
ដើម្បីផ្តល់ចរន្តអគ្គិសនីសម្រាប់ដំណើរការជែល អ្នកនឹងត្រូវការការផ្គត់ផ្គង់ថាមពលអគ្គិសនី។នៅ Liuyi Biotechnology យើងផ្តល់នូវការផ្គត់ផ្គង់ថាមពល electrophoresis ជាច្រើនសម្រាប់គ្រប់កម្មវិធីទាំងអស់។ម៉ូដែល DYY-12 និង DYY-12C ដែលមានតង់ស្យុង និងចរន្តខ្ពស់អាចបំពេញតម្រូវការ electrophoresis តង់ស្យុងខ្ពស់។វាមានមុខងារនៃការឈរ, ពេលវេលា, VH និងកម្មវិធីជាជំហាន ៗ ។ពួកវាល្អសម្រាប់កម្មវិធី IEF និង DNA sequencing electrophoresis ។សម្រាប់កម្មវិធី electrophoresis ប្រូតេអ៊ីន និង DNA ទូទៅ យើងមានគំរូ DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 និងផ្សេងៗទៀត ដែលជាការផ្គត់ផ្គង់ថាមពលលក់ក្តៅជាមួយកោសិកា electrophoresis (ធុង/បន្ទប់)។ទាំងនេះអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់កម្មវិធី electrophoresis តង់ស្យុងមធ្យម និងទាប ដូចជាសម្រាប់ការប្រើប្រាស់មន្ទីរពិសោធន៍សាលារៀន មន្ទីរពិសោធន៍មន្ទីរពេទ្យជាដើម។ម៉ូដែលជាច្រើនទៀតសម្រាប់ការផ្គត់ផ្គង់ថាមពល សូមចូលទៅកាន់គេហទំព័ររបស់យើង។
យីហោ Liuyi មានប្រវត្តិជាង 50 ឆ្នាំនៅក្នុងប្រទេសចិន ហើយក្រុមហ៊ុនអាចផ្តល់នូវផលិតផលដែលមានស្ថេរភាព និងគុណភាពខ្ពស់នៅជុំវិញពិភពលោក។តាមរយៈការអភិវឌ្ឍន៍ជាច្រើនឆ្នាំ វាសក្តិសមជាជម្រើសរបស់អ្នក!
សម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែមអំពីយើងខ្ញុំ សូមទាក់ទងមកយើងខ្ញុំតាមអ៊ីមែល[អ៊ីមែលការពារ] or [អ៊ីមែលការពារ].
សេចក្តីយោងសម្រាប់អ្វីទៅជា polyacrylamide gel electrophoresis?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis របៀបដែលវាដំណើរការ វ៉ារ្យ៉ង់បច្ចេកទេស និងកម្មវិធីរបស់វា
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី២៣ ខែឧសភា ឆ្នាំ២០២២