គោលការណ៍នៃការពិសោធន៍
Electrophoresis អេម៉ូក្លូប៊ីនមានគោលបំណងស្វែងរក និងបញ្ជាក់អេម៉ូក្លូប៊ីនធម្មតា និងមិនធម្មតាផ្សេងៗ។
ដោយសារការចោទប្រកាន់ផ្សេងគ្នា និងចំនុច isoelectric នៃប្រភេទអេម៉ូក្លូប៊ីនផ្សេងៗគ្នា នៅក្នុងដំណោះស្រាយសតិបណ្ដោះអាសន្ន pH ជាក់លាក់មួយ នៅពេលដែលចំនុច isoelectric នៃអេម៉ូក្លូប៊ីនទាបជាង pH នៃដំណោះស្រាយសតិបណ្ដោះអាសន្ន អេម៉ូក្លូប៊ីនផ្ទុកបន្ទុកអវិជ្ជមាន ហើយធ្វើចំណាកស្រុកឆ្ពោះទៅកាន់ anode កំឡុងពេល electrophoresis ។ ផ្ទុយទៅវិញអេម៉ូក្លូប៊ីនដែលមានបន្ទុកវិជ្ជមានផ្លាស់ទីឆ្ពោះទៅរក cathode ។
នៅក្រោមវ៉ុលជាក់លាក់មួយ និងបន្ទាប់ពីពេលវេលា electrophoresis ជាក់លាក់ អេម៉ូក្លូប៊ីនដែលមានបន្ទុកផ្សេងគ្នា និងទម្ងន់ម៉ូលេគុលបង្ហាញទិសដៅ និងល្បឿននៃការធ្វើចំណាកស្រុកផ្សេងៗគ្នា។ នេះអនុញ្ញាតឱ្យមានការបំបែកតំបន់ដាច់ដោយឡែក ហើយការវិភាគការស្កេនពណ៌បន្ទាប់បន្សំ ឬ electrophoretic អាចត្រូវបានអនុវត្តនៅលើតំបន់ទាំងនេះដើម្បីកំណត់បរិមាណអេម៉ូក្លូប៊ីនផ្សេងៗ។ វិធីសាស្រ្តដែលប្រើជាទូទៅបំផុតគឺ pH 8.6 cellulose acetate membrane electrophoresis ។
នៅក្នុង cytoplasm ក្រុម ethylene glycol (CHOH-CHOH) ដែលមាននៅក្នុង glycogen ឬ polysaccharides (ដូចជា mucopolysaccharides, mucoproteins, glycoproteins, glycolipids ជាដើម) ត្រូវបានកត់សុីដោយអាស៊ីតតាមកាលកំណត់ ហើយបំប្លែងទៅជាក្រុម aldehyde (CHO-O) ។ ក្រុម aldehyde ទាំងនេះរួមផ្សំជាមួយនឹងសារធាតុ Schiff-red purplish-red colorless បង្កើតជាថ្នាំជ្រលក់ពណ៌ស្វាយ-ក្រហម ដែលដាក់នៅកន្លែងដែលមានសារធាតុ polysaccharides នៅក្នុងកោសិកា។ ប្រតិកម្មនេះត្រូវបានគេស្គាល់ថាជាការស្នាមប្រឡាក់អាស៊ីតតាមកាលកំណត់ (PAS) ដែលពីមុនគេហៅថាជាស្នាមប្រឡាក់ glycogen ។
វិធីសាស្រ្តពិសោធន៍
សម្ភារ:សែលុយឡូសអាសេតាតមេbrane, ឧបករណ៍ electrophoresis(DYCP-38C និងការផ្គត់ផ្គង់ថាមពល DYY-6C), ឧបករណ៍ផ្ទុកគំរូដ៏អស្ចារ្យ(pipette), spectrophotometer, colorimetric cuvettes, សតិបណ្ដោះអាសន្ន។
សតិបណ្ដោះអាសន្ន៖
(1) pH 8.6 TEB Buffer: ទម្ងន់ 10.29 ក្រាម Tris, 0.6 ក្រាម EDTA, 3.2 ក្រាម អាស៊ីត boric និងបន្ថែមទឹកចម្រោះទៅ 1000 មីលីលីត្រ។
(2) Borate Buffer: ថ្លឹង 6.87 ក្រាម borax និង 5.56 ក្រាម boric acid ហើយបន្ថែមទឹកចម្រោះទៅ 1000 មីលីលីត្រ។
នីតិវិធី៖
Pសំណងនៃដំណោះស្រាយអេម៉ូក្លូប៊ីន
យកឈាម 3 មីលីលីត្រដែលមានផ្ទុក heparin ឬ sodium citrate ជាថ្នាំប្រឆាំងនឹងការកកឈាម។ Centrifuge នៅ 2000 rpm រយៈពេល 10 នាទីហើយបោះចោលប្លាស្មា។ លាងសម្អាតកោសិកាឈាមក្រហមបីដងដោយទឹកអំបិលសរីរវិទ្យា (750 rpm, 5 នាទី centrifugation រាល់ពេល)។ Centrifuge នៅ 2200 rpm រយៈពេល 10 នាទី ហើយបោះចោល supernatant ។ បន្ថែមបរិមាណស្មើគ្នានៃទឹកចម្រោះ បន្ទាប់មកបន្ថែម 0.5 ដងនៃបរិមាណកាបូន tetrachloride ។ អ្រងួនយ៉ាងខ្លាំងរយៈពេល 5 នាទី ហើយបន្ទាប់មកចាប់កណ្តាលនៅ 2200 rpm រយៈពេល 10 នាទី ដើម្បីប្រមូលដំណោះស្រាយ Hb ខាងលើសម្រាប់ប្រើប្រាស់នៅពេលក្រោយ។
ត្រាំ Membrane
កាត់ភ្នាសសែលុយឡូសអាសេតាតចូលទៅក្នុងច្រូតដែលមានទំហំ 3 សង់ទីម៉ែត្រ × 8 សង់ទីម៉ែត្រ។ ត្រាំពួកវាក្នុង pH 8.6 TEB buffer រហូតទាល់តែឆ្អែតពេញលេញ បន្ទាប់មកយកវាចេញ ហើយជូតស្ងួតជាមួយក្រដាសតម្រង។
ការសម្គាល់
ប្រើបំពង់ដើម្បីសម្គាល់ 10 μlនៃដំណោះស្រាយអេម៉ូក្លូប៊ីនបញ្ឈរទៅលើភ្នាសសែលុយឡូសអាសេតាត (ផ្នែករដុប) ប្រហែល 1.5 សង់ទីម៉ែត្រពីគែម។
អេឡិចត្រូហ្វីស
ចាក់សូលុយស្យុងសតិបណ្ដោះអាសន្ន borate ចូលទៅក្នុងអង្គជំនុំជម្រះ electrophoresis ។ ដាក់ភ្នាសសែលុយឡូសអាសេតាតជាមួយនឹងផ្នែកដែលប្រទះឃើញនៅចុង cathode នៃអង្គជំនុំជម្រះ។ រត់នៅ 200 V រយៈពេល 30 នាទី។
Elution
កាត់តំបន់ HbA និង HbA2 ដាក់វានៅក្នុងបំពង់សាកល្បងដាច់ដោយឡែក ហើយបន្ថែម 15 មីលីលីត្រ និង 3 មីលីលីត្រនៃទឹកចម្រោះរៀងៗខ្លួន។ អ្រងួនថ្នមៗដើម្បីបន្សាបជាតិអេម៉ូក្លូប៊ីនទាំងស្រុង បន្ទាប់មកលាយ.
ពណ៌
សូន្យការស្រូបយកដោយប្រើទឹកចម្រោះសម្រាប់ដំណោះស្រាយ elution និងវាស់ការស្រូបយកនៅ 415 nm ។
ការគណនា
HbA2(%) = ការស្រូបយកបំពង់ HbA2 / (ការស្រូបយកបំពង់ HbA × 5 + ការស្រូបយកបំពង់ HbA2) × 100%
ការគណនាលទ្ធផលពិសោធន៍
ជួរយោងសម្រាប់ pH 8.6 TEB Buffer Cellulose Acetate Electrophoresis: HbA > 95%, HbA2 1%-3.1%
កំណត់ចំណាំ
ពេលវេលា Electrophoresis មិនគួរយូរពេកទេ។ ភ្នាស cellulose acetate មិនគួរស្ងួតក្នុងអំឡុងពេល electrophoresis ។ បញ្ឈប់ electrophoresis នៅពេលដែល HbA និង HbA2 ត្រូវបានបំបែកយ៉ាងច្បាស់។ electrophoresis អូសបន្លាយអាចបណ្តាលឱ្យមានការសាយភាយ និងធ្វើឱ្យព្រិល។
ជៀសវាងការប្រើគំរូច្រើនពេក។ សារធាតុរាវអេម៉ូក្លូប៊ីនច្រើនហួសប្រមាណអាចនាំឱ្យមានការបំបែកក្រុម ឬស្នាមប្រឡាក់មិនគ្រប់គ្រាន់ ដែលនាំឱ្យកម្រិត HbA កើនឡើងមិនពិត។
ទប់ស្កាត់ការចម្លងរោគនៃភ្នាសសែលុយឡូសអាសេតាតជាមួយនឹងប្រូតេអ៊ីន។
ចរន្តមិនគួរខ្ពស់ពេក; បើមិនដូច្នេះទេ អេម៉ូក្លូប៊ីន ប្រហែលជាមិនអាចបំបែកបានទេ។
តែងតែរួមបញ្ចូលសំណាកពីបុគ្គលធម្មតា និង អេម៉ូក្លូប៊ីនមិនធម្មតាដែលគេស្គាល់ចាំបាច់ជាការត្រួតពិនិត្យ។
Beijing Liuyi Biotechnology ផលិតធុង electrophoresis ដែលមានជំនាញវិជ្ជាជីវៈសម្រាប់ hemoglobin electrophoresis ដែលជាគំរូDYCP-38Ccellulose acetate membrane electrophoresis tank ហើយមានការផ្គត់ផ្គង់ថាមពល electrophoresis ពីរម៉ូដែលដែលអាចរកបានសម្រាប់ធុង cellulose acetate membrane electrophoresisDYY-2CនិងDYY-6Cការផ្គត់ផ្គង់ថាមពល។
ទន្ទឹមនឹងនេះដែរ បច្ចេកវិទ្យាជីវសាស្រ្តប៉េកាំង Liuyi ផ្តល់នូវភ្នាស cellulose acetate សម្រាប់អតិថិជន ហើយទំហំនៃ cellulose acetate membrane អាចត្រូវបានប្ដូរតាមបំណង។ សូមស្វាគមន៍មកកាន់ការសាកសួរយើងសម្រាប់គំរូ និងព័ត៌មានបន្ថែម។
យីហោ Beijing Liuyi មានប្រវត្តិជាង 50 ឆ្នាំនៅក្នុងប្រទេសចិន ហើយក្រុមហ៊ុនអាចផ្តល់នូវផលិតផលដែលមានស្ថេរភាព និងគុណភាពខ្ពស់នៅជុំវិញពិភពលោក។ តាមរយៈការអភិវឌ្ឍន៍ជាច្រើនឆ្នាំ វាពិតជាសក្តិសមជាជម្រើសរបស់អ្នក!
ឥឡូវនេះយើងកំពុងស្វែងរកដៃគូរ ទាំងធុង OEM electrophoresis និងអ្នកចែកចាយត្រូវបានស្វាគមន៍។
ប្រសិនបើអ្នកមានគម្រោងទិញផលិតផលរបស់យើង សូមកុំស្ទាក់ស្ទើរក្នុងការទាក់ទងមកយើងខ្ញុំ។ អ្នកអាចផ្ញើសារមកយើងតាមអ៊ីមែល[អ៊ីមែលការពារ]ឬ[អ៊ីមែលការពារ]ឬសូមទូរស័ព្ទមកយើងតាមរយៈ +86 15810650221 ឬបន្ថែម Whatsapp +86 15810650221 ឬ Wechat: 15810650221
ពេលវេលាប្រកាស៖ ថ្ងៃទី ២០ ខែកញ្ញា ឆ្នាំ ២០២៣